一種用于檢測(cè)5?羥甲基糠醛的電化學(xué)生物傳感器及其檢測(cè)方法，包括由工作電極、參比電極和對(duì)電極組成的三電極體系，其特征在于：所述工作電極為銅鎳雙金屬納米粒子修飾的銅電極。本發(fā)明提供了一種基于銅鎳雙金屬納米粒子修飾電極的電化學(xué)生物傳感器，可在堿性介質(zhì)中檢測(cè)5?HMF。一方面，銅納米粒子和鎳納米粒子同時(shí)電沉積到銅電極表面，可以增強(qiáng)銅電極的導(dǎo)電性，提高檢測(cè)靈敏度；另一方面，銅?鎳雙金屬納米粒子可在堿性介質(zhì)中電化學(xué)氧化為高價(jià)的CuOOH/NiOOH，可催化氧化5?HMF從而產(chǎn)生氧化峰電流。采用線性掃描伏安法或安培法記錄信號(hào)，氧化峰電流I_P或電流變化△I與檢測(cè)物5?HMF的濃度呈正比，從而起到檢測(cè)的目的。其中，安培法檢測(cè)的靈敏度較高，檢出限較低。