本發(fā)明涉及一種基于鄰位觸擊效應(yīng)的均相化學(xué)發(fā)光免疫分析方法。該方法的檢測溶液包括DNA1-抗體1偶聯(lián)物、DNA2-抗體2偶聯(lián)物、輔助DNA3、輔助DNA4、分子信標(biāo)DNA5和限制性內(nèi)切酶。目標(biāo)蛋白質(zhì)存在時，DNA1-抗體1與DNA2-抗體2形成夾心免疫復(fù)合物，使得分別與DNA1、DNA2雜交的DNA3、DNA4相互靠近，形成鄰位觸擊復(fù)合物，與DNA5雜交打開其發(fā)卡結(jié)構(gòu)，染料Cy5遠(yuǎn)離猝滅劑產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。復(fù)合物與DNA5形成的雙鏈還能被內(nèi)切酶識別，將DNA5剪切后打開新的DNA5，如此循環(huán)可在位放大發(fā)光，實現(xiàn)對目標(biāo)蛋白質(zhì)的高靈敏定量分析。該發(fā)明實現(xiàn)了蛋白質(zhì)快速、一步化檢測，操作簡單、普適性高。