本發(fā)明涉及免疫分析醫(yī)學領(lǐng)域,具體地,本發(fā)明提供了一種透明質(zhì)酸測定試劑盒及其制備方法。根據(jù)本發(fā)明的試劑盒包括:1)透明質(zhì)酸校準品;2)親和素化的固相載體;3)生物素化的透明質(zhì)酸多克隆抗體或單克隆抗體;4)透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白的標記物;5)化學發(fā)光底物;以及6)洗滌液。進一步,根據(jù)本發(fā)明制備上述試劑盒的方法包括以下步驟:1)以透明質(zhì)酸純品配制校準品;2)以親和素包被載體;3)使透明質(zhì)酸的多克隆抗體或單克隆抗體生物素化;4)用標記物標記透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白;5)配制化學發(fā)光底物;6)配制洗滌液;7)分裝上述校準品、標記物、化學發(fā)光底物和洗滌液;以及8)組裝為成品。本發(fā)明的試劑盒具有簡便、快速、靈敏、穩(wěn)定等優(yōu)點。