本發(fā)明涉及一種固定化酶催化作用下無副產(chǎn)甘油的生物柴油制備方法,將酯交換試劑與動植物油脂混合,在固定化酶催化劑存在下,在恒溫水浴搖床中反應溫度為20～100℃,反應時間為15～48小時,其中,酯交換試劑與動植物油脂的摩爾質(zhì)量比為2∶1～30∶1,催化劑添加量為動植物油脂質(zhì)量比例的1～30%;過濾除去催化劑并蒸餾除去過量的酯交換試劑,產(chǎn)品即為生物柴油。本發(fā)明的優(yōu)點:采用新型酯交換試劑替代甲醇,避免了傳統(tǒng)工藝中甲醇使酶催化劑容易失活的缺陷;催化劑易于分離,無須水洗,不產(chǎn)生廢水,催化劑可以重復使用;不產(chǎn)生甘油,油脂與新型酯交換試劑發(fā)生酯交換反應可聯(lián)產(chǎn)甘油下游產(chǎn)品作為生物柴油的組分之一,無須分離,提高了原料的利用率。