本發(fā)明公開了一種中國大鯢雌性特異標記及應用，步驟是：A、克隆與驗證特異片段：1）中國大鯢RAD候選雌性特異片段分析；2）PCR產(chǎn)物回收，克隆，測序;3）克隆測序序列的分析。B、組織切片鑒定生理性別：1）將收集的大鯢性腺樣本固定、保存。2）將樣品進行逐級乙醇脫水；3）將性腺組織切片、觀察鑒定大鯢生理性別；C、遺傳性別鑒定體系建立：1）基因組DNA提?。?）設計特異引物：克隆驗證后序列SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2所示的核苷酸序列；3）根據(jù)反應體系進行PCR擴增；D、特異分子標記在大鯢普通個體以及性反轉(zhuǎn)個體性別鑒定中的應用。該標記操作簡單、準確可靠，可通過無損傷采樣鑒定大鯢遺傳性別。首次建立大鯢性別及性反轉(zhuǎn)大鯢鑒定系統(tǒng)，為大鯢遺傳性別鑒定提供簡單易行的分子生物學方法，也為后續(xù)大鯢性控育種提供一種途徑。