本發(fā)明提供了一種固相制備核酸分子克隆的方法,制備步驟為:制備單鏈環(huán)形核酸模板;制備與上述模板相應(yīng)的引物,其5’端核酸上修飾有化學(xué)基團(tuán):丙烯酰胺基團(tuán)、氨基、醛基或生物素;將所得的引物加入到固相載體中,將引物經(jīng)過化學(xué)反應(yīng),連接在固相載體上;將所得的模板、生物酶、核酸單體、以及擴(kuò)增溶液加入到經(jīng)處理完畢的固相載體中;利用超支滾環(huán)擴(kuò)增法進(jìn)行擴(kuò)增,形成單一的核酸分子克隆;互補(bǔ)自由鏈的去除。該技術(shù)具有制備簡(jiǎn)單,擴(kuò)增效率高、對(duì)于不同DNA片斷的擴(kuò)增平行性好等優(yōu)點(diǎn)。該技術(shù)可以在一個(gè)載體基片的不同位置制備不同的克隆,實(shí)現(xiàn)高密度測(cè)序模板芯片的制備。