本發(fā)明屬于熒光探針應用技術領域，尤其涉及一種2?2環(huán)芳吡喃酮pH熒光比率探針的制備方法及應用。所述2?2環(huán)芳吡喃酮pH熒光比率探針的化學結構式為：與現有技術相比，本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果在于，本發(fā)明通過一種全新配方和制備方法使制得的熒光探針化合物能夠通過熒光強度測定pH值范圍為2?7的伯瑞坦?羅比森緩沖溶液的pH，且具有極高的線性關系(R2＝0.99613)，同時，本發(fā)明的熒光探針化合物其激發(fā)波長較長，對細胞的損傷小，具有應用于細胞內檢測的潛能。