本發(fā)明公開了一種蜂蜜中氨基酸的測定方法，其特征在于：前處理選用含有內(nèi)標(biāo)的稀鹽酸超聲萃取蜂蜜樣品，過濾膜后直接進(jìn)入高效液相串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行測定，內(nèi)標(biāo)法定量。本方法采用直接進(jìn)樣，可快速、準(zhǔn)確檢測出蜂蜜中21種氨基酸的含量。本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)樣品處理方法的不足，與傳統(tǒng)的柱前衍生方式比較，直接進(jìn)樣，無交叉污染，樣品待測物質(zhì)損失少，實(shí)驗(yàn)過程不使用有毒有害化學(xué)品，對操作人員危害小，易于操作。針對蜂蜜基質(zhì)復(fù)雜的特征采用優(yōu)化的梯度洗脫程序，消除干擾，回收率高，測定結(jié)果準(zhǔn)確。