本發(fā)明涉及一種檢測(cè)組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子(rhbFGF)的免疫膠乳微球及其制備方法,該免疫微球由抗hbFGF蛋白多克隆抗體包被,微球顆粒大小50nm;所述的免疫微球制備的方法,是根據(jù)原核細(xì)胞表達(dá)的優(yōu)先密碼子重新修飾并構(gòu)建全長人bFGF(hbFGF)基因表達(dá)序列,將基因序列通過限制酶切割插入谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)基因融合表達(dá)載體中并進(jìn)行細(xì)菌表達(dá),利用親合層析柱純化獲得GST-hbFGF融合蛋白,以凝血酶切割該融合蛋白,經(jīng)親合層析柱去除凝血酶后獲得人bFGF,再將佐劑溶合抗原后免疫小鼠,經(jīng)分離純化得到hbFGF多克隆抗體,將抗體通過化學(xué)偶聯(lián)法偶聯(lián)活化后的微球,得到檢測(cè)hbFGF的免疫膠乳微球;所述的檢測(cè)hbFGF的應(yīng)用,是指通過酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法,檢測(cè)hbFGF樣品,最低檢測(cè)限為hbFGF蛋白50pg/ml,相關(guān)系數(shù)R2=0.83;該免疫膠乳微球用于檢測(cè)重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子靈敏度較高,且操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性強(qiáng)。
聲明:
“檢測(cè)重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子(rhbFGF)的免疫膠乳微球及其制備方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請(qǐng)聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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