本發(fā)明公開了一種人胰多肽核酸適配體及其篩選方法和應用，人胰多肽核酸適配體為以Q10、5’?Q11?FAM?3’、5’?Q12?FAM?3’、5’?BHQ1?Q13?3’、5’?Q14?BHQ1?3’、5’?SH?Q16?3’、5’?SH?Q17?3’中的任意一種。其篩選方法包括合成隨機文庫和引物、GO?SELEX篩選、PCR擴增文庫、制備DNA單鏈文庫、重復篩選、陰性篩選、多輪篩選等步驟。本發(fā)明的人胰多肽核酸適配體可應用于制備檢測人胰多肽的試劑盒，具有比蛋白抗體更高的親和力與特異性、無免疫原性、能夠化學合成、分子量小、穩(wěn)定、易于保存和標記等優(yōu)勢。