納米纖維素紙基生物傳感器的構建方法，涉及一種生物傳感器的構建方法。是要解決現(xiàn)有紙基生物傳感器存在的內(nèi)部孔隙大、表面粗糙，導致的檢測效率和準確度差的問題。方法：一、納米纖維素的制備：將纖維素原料依次進行抽提處理和去木質素處理，得到綜纖維素，然后進行機械預處理、化學機械混合預處理或生物機械混合預處理，得到含半纖維素的納米纖維素水液；二、納米紙的制備；三、納米紙基生物傳感器構建。經(jīng)過檢測，本發(fā)明制備的納米紙無明顯空隙，粗糙度在微米級以下，納米紙孔隙率大于1％、粗糙度小于1um。本發(fā)明用于生物傳感器領域。