本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，涉及一種降解獲得及檢測硫酸軟骨素和透明質酸二糖的方法，包括如下步驟：(1)將硫酸軟骨素或透明質酸脫乙?；?，得脫乙酰產物；(2)將脫乙酰產物亞硝酸降解，得硫酸軟骨素二糖或透明質酸二糖；(3)將二糖濃縮至干，溶解于水中，調節(jié)pH值為堿性，加入吡唑啉酮類衍生試劑，反應完成后用氯仿萃取三次去除多余的衍生試劑；(4)用液相色譜(LC)法或液相色譜質譜聯(lián)用(LC-MS)法檢測衍生后的二糖。本發(fā)明化學降解法可將硫酸軟骨素或透明質酸完全降解為二糖，可以保存全部的糖醛酸信息，降解條件溫和，成本低，操作簡單，對實驗儀器要求低，檢測耗時短，樣品消耗量小，靈敏度高，分析結果重復性好。