本發(fā)明公開(kāi)了一種化學(xué)發(fā)光液的應(yīng)用方法，包括如下步驟：十二烷基硫酸鈉?聚丙烯酰胺凝膠電泳操作和電轉(zhuǎn)膜操作，將轉(zhuǎn)印好的膜從轉(zhuǎn)膜裝置上取下來(lái)，利用封閉膜上的非特異結(jié)合位點(diǎn)，置于搖床上在室溫下震蕩封閉1小時(shí)或在2?8攝氏度溫度下震蕩封閉8小時(shí)；用ECL工作液充分覆蓋膜后在室溫下孵育1分鐘；吸棄多余的ECL工作液，將膜置于兩層保鮮膜之間，趕走膜與保鮮膜之間的氣泡；將膜片吸附蛋白的面朝上置于暗盒中，在暗室中，取出膠片覆于膜表面后進(jìn)行曝光操作或使用成像系統(tǒng)對(duì)所述膜片進(jìn)行掃描成像。本實(shí)施例所提供的化學(xué)發(fā)光液的應(yīng)用方法，可用于實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的探針或者抗體。