本發(fā)明公開了用于微量DNA超低頻突變檢測的雙分子自校驗文庫制備及雜交捕獲的二代測序方法。該方法包括如下步驟：血漿游離DNA提取，DNA化學(xué)錯誤修復(fù)，自校驗雙分子識別碼發(fā)夾型接頭制備，血漿游離DNA修復(fù)，DNA與接頭連接，Pre?PCR擴增，超量雜交捕獲，Post?PCR擴增，上機測序，數(shù)據(jù)糾錯校正，突變分析與注釋。本發(fā)明的方法可以高效實現(xiàn)血漿循環(huán)游離DNA的低頻突變檢測。DNA錯誤修復(fù)和雙重冗余校驗技術(shù)使得該方法在檢測微量樣本時具有超低的假陽性率和高靈敏度，避免了現(xiàn)有血漿循環(huán)游離DNA檢測方法的缺陷，不僅可以實現(xiàn)癌癥突變檢測和靶向用藥指導(dǎo)，也可實現(xiàn)胎兒遺傳和出生缺陷早期篩查。