本發(fā)明公開了生產(chǎn)MSTN雙側(cè)基因敲除的雙肌性狀體細胞克隆豬的方法,其利用高效簡便的基因修飾技術(shù)TALEN技術(shù),設(shè)計構(gòu)建能高效敲除MSTN基因的質(zhì)粒;通過電轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染豬胎兒成纖維細胞,磁珠分選陽性細胞作為供體細胞,化學(xué)輔助去核方法去核后進行體細胞核移植;經(jīng)胚胎移植確定妊娠后26-36天取出胎兒進行基因測序,以MSTN雙側(cè)基因敲除胎兒細胞作為供體細胞再次體細胞核移植,胚胎移植;足月分娩后免疫組化及形態(tài)學(xué)觀察,確定為雙肌性狀克隆豬。獲得MSTN-/-雙側(cè)敲除的雙肌性狀克隆公豬,取精液對發(fā)情母豬進行人工受精,獲得大量雙肌豬。本發(fā)明工藝簡單,易于實施,且可產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)雙肌豬,利于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和醫(yī)學(xué)研究。
聲明:
“生產(chǎn)MSTN雙側(cè)基因敲除的雙肌性狀體細胞克隆豬的方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)