本發(fā)明公開了一種DNA-AuNPs納米網絡結構的制備方法及應用，包括Au?NPs的制備、DNA功能化Au?NPs的制備和DNA-AuNPs納米網絡結構的層層組裝；本發(fā)明利用DNA-AuNPs做納米信標，利用DNA的互補特性形成雙鏈DNA，進而形成納米網絡結構，有利于RuHeX這種電活性物質的吸附；而利用DNA的互補的性能形成DNA-Au?NPs的網狀結構，為電活性物質的吸附提供了大量的位點，從而實現電化學信號的放大，用于蛋白激酶活性及其抑制劑分析，通過鋯離子的配位作用，利于納米網絡結構修飾在電極表面，為活性物質提供了大量的負載位點，極大增強了電化學信號，因此，該生物傳感器對激酶活性的最低檢測限值達到0.03U/mL，同時穩(wěn)定性高、線性范圍寬。