本發(fā)明提供一種檢測溶酶體內(nèi)生物硫醇的熒光探針，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：。該探針在Cys和Hcy存在的情況下，探針在兩個獨立波長的激發(fā)下分別在480nm和550nm處產(chǎn)生藍色和綠色兩種不同的熒光發(fā)射。然而，在探針中加入GSH和Na₂S時只會在480nm處產(chǎn)生藍色熒光。這種差異可以合理地歸因于NBD?GSH/SH中間體與NBD Cys/Hcy不同，不能發(fā)生分子內(nèi)環(huán)化重排反應(yīng)。同時，由于嗎啉具有溶酶體靶向性，可以將溶酶體和其他細胞器區(qū)分。該熒光探針具有溶酶體靶向性好、特異性強，響應(yīng)快等優(yōu)點，可用于活細胞溶酶體內(nèi)生物硫醇的實時可視化測定，且可經(jīng)化學(xué)合成獲得，合成工藝簡單易行，原料廉價易得，制備成本低，易于推廣。