本發(fā)明涉及一種基于靶標蛋白誘導(dǎo)DNA酶循環(huán)生成的均相免疫分析方法。該免疫分析方法的檢測溶液包括抗體1?DNA1偶聯(lián)物、抗體2?DNA2偶聯(lián)物、血紅素hemin、核酸外切酶III和DNA3/DNA4雙鏈DNA。當(dāng)靶標蛋白存在時，可被抗體1?DNA1偶聯(lián)物和抗體2?DNA2偶聯(lián)物同時免疫識別，基于鄰位效應(yīng)，DNA1與DNA2進行雜交形成復(fù)合物，而后與雙鏈DNA上的DNA3發(fā)生鏈取代反應(yīng)，進而釋放出富含G序列的DNA4與hemin結(jié)合形成G?四鏈體/hemin DNA酶，此外，與DNA1和DNA2反應(yīng)的DNA3能被核酸外切酶III識別并切斷，使得DNA1和DNA2可與另一個DNA3發(fā)生鏈取代反應(yīng)，從而釋放另一個DNA4生成DNA酶，如此循環(huán)，生成大量的DNA酶。該DNA酶可催化TMB顯色和魯米諾發(fā)光，通過比色或化學(xué)發(fā)光成像的方法可對靶標蛋白進行靈敏的定量分析。該免疫分析方法操作簡單、快速、靈敏、普適性高，具有一定的臨床應(yīng)用價值。