本發(fā)明屬于代謝組學(xué)及生命分析化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體為基于N?烷基化法的多種氨基代謝物同步定量分析方法。本發(fā)明步驟包括：氨基代謝物標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制；氨基代謝物的烷基化反應(yīng)；采用UHPLC?MS/MS對(duì)多種烷基化氨基代謝物的定量檢測(cè)分析。本發(fā)明采用還原胺化法，利用NaBH₃CN/NaBD₃CN和五種醛（乙醛，丙醛，丁醛，戊醛和己醛）對(duì)代謝物的氨基烷基化（乙基化，丙基化，丁基化，戊基化，己基化）修飾，不僅改善了氨基代謝物在色譜反相柱上保留，提高其質(zhì)譜離子化效率，還可實(shí)現(xiàn)更為精準(zhǔn)的同位素內(nèi)標(biāo)定量測(cè)量。本發(fā)明衍生化條件溫和、反應(yīng)效率高、易于淬滅且后處理簡(jiǎn)單，具有較高檢測(cè)靈敏度。