本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)檢測領(lǐng)域并公開了一種胰島素納米磁微粒化學(xué)發(fā)光測定試劑盒及其制備方法與檢測方法；該試劑盒包括：M試劑、R試劑、胰島素校準(zhǔn)品、反應(yīng)增強(qiáng)劑和化學(xué)發(fā)光底物液，所述的M試劑包括濃度為2μg/mL包被INS?生物素化抗體的磁微粒、濃度為0.2mol/L的Tris緩沖液；所述的R試劑包括濃度為1μg/mL的INS?AP標(biāo)記抗體、濃度為0.1mol/L的Tris緩沖液；所述的胰島素校準(zhǔn)品包括兩種不同濃度的胰島素樣品及0.1mol/L濃度的Tris緩沖液；本發(fā)明試劑盒具有特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好的有益效果，提高了檢測的靈敏度和特異性、適于自動(dòng)化操作；本發(fā)明制備方法簡單、容易在工業(yè)化生產(chǎn)中實(shí)現(xiàn)，有利于提高制備效率；同時(shí)，本發(fā)明檢測方法檢測過程簡單，大大簡化了現(xiàn)有的檢測步驟和程序。