本發(fā)明公開了一種昆蟲細(xì)胞無血清培養(yǎng)基及其應(yīng)用。該培養(yǎng)基包含氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和碳水化合物等；進(jìn)一步的，還包含0.5～15mg/L二亞油酰磷脂酰膽堿和/或0.1～10mg/L二硬脂酰磷脂酰膽堿；尤其是，還可包含0.001～0.1mg/L二水氯化鋇、0.005～0.02mg/L氯化鋰、0.05～7mg/L氯化鎳。本發(fā)明的昆蟲細(xì)胞無血清培養(yǎng)基組分簡(jiǎn)單明確，易于制備，成本低廉，且可大幅提升昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)效率和重組蛋白表達(dá)效率，利于實(shí)現(xiàn)昆蟲細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)和重組蛋白的大規(guī)模制備。