本發(fā)明提供了一種凝血酶定量檢測(cè)酶試劑的制備方法及凝血酶定量檢測(cè)卡，所述凝血酶定量檢測(cè)酶試劑的制備方法包括：向緩沖溶液中加入丙烯酰胺和過(guò)硫酸銨，得到第一混合溶液；向第一混合溶液中加入多肽底物和穩(wěn)定劑，得到第二混合溶液；將WS2/C復(fù)合材料加入到水溶液中進(jìn)行超聲處理，再加入到第二混合溶液中，得到凝血酶定量檢測(cè)酶試劑；所述凝血酶定量檢測(cè)卡包括電極基片與親水膜層，所述電極基片上設(shè)有檢測(cè)區(qū)域和絕緣層，且所述檢測(cè)區(qū)域上涂覆有上述制備方法制得的凝血酶定量檢測(cè)酶試劑。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，采用本發(fā)明提供的凝血酶定量檢測(cè)酶試劑的制備方法及凝血酶定量檢測(cè)卡，能夠?qū)δ高M(jìn)行定量檢測(cè)，靈敏度高且重復(fù)性好。